期刊简介
本刊由卫生部主管，中华预防医学会和天津市卫生防病中心联合主办。于1984年创刊，是环境卫生学专业的学术性期刊（中华预防医学会环境卫生分会唯一认定期刊）。杂志编辑委员会由国内著名的环境卫生学及相关学科的专家、教授组成。本刊报道宗旨是：以预防医学与环境科学相结合，紧密围绕党和国家的卫生工作方针，全方位促进全国各地环境卫生工作水平的提高。主要读者对象：环境卫生、环境医学、环境保护专业工作者，各大专院校卫生学和环境科学的师生等。主要栏目：述评、专题报告、论著、调查研究、技术与方法、监督监测、专业信息、工作交流、卫生标准、综述、讲座等
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首页>环境与健康杂志
- 杂志名称：环境与健康杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华预防医学会,天津市疾病预防控制中心
- 国际刊号：1001-5914
- 国内刊号：12-1095/R
- 出版周期：
期刊荣誉：中华预防医学会系列杂志优秀期刊期刊收录：
慢病毒介导的稳定过表达人谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基基因的WRL68细胞株构建
范誉；农清清；廖娟；胡新梅；朱雪凤；李江恒；郭尧平；陆继培
关键词：慢病毒载体, GCLC, 过表达, WRL68细胞
摘要：目的 利用慢病毒载体构建稳定过表达人谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)的WRL68细胞株.方法 采用PCR方法合成GCLC基因全长,经NotⅠ、NsiⅠ酶切后克隆到慢病毒载体LV6上;采用PCR、酶切、测序鉴定重组质粒LV6-GCLC;将重组质粒转染293T细胞,收集培养上清并感染WRL68细胞,经嘌呤霉素筛选出稳定过表达细胞株.采用增强型绿色荧光蛋白检测转染情况,采用Real-time PCR及Western blotting鉴定所构建的细胞株;MTT法检测细胞活性;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞谷胱甘肽(GSHl)含量.结果 PCR、酶切及测序结果表明重组慢病毒载体构建成功;重组慢病毒转染293T细胞后可观察到荧光及蛋白表达,包装过表达慢病毒并检测其浓缩滴度为1.0× 109 TU/ml;用1μg/ml嘌呤霉素成功筛选出稳定过表达细胞株;GCLC过表达组中GCLC的mRNA和蛋白的表达量高于空载体转染组及对照组(P＜0.05);GCLC过表达组、空载体转染组及对照组的细胞活性间比较,差异无统计学意义(P＞0.05);GCLC过表达组GSH含量明显高于空载体转染组及对照组(P＜0.05).结论 成功构建了稳定过表达人GCLC的WRL68细胞株.
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