期刊简介
本刊由卫生部主管，中华预防医学会和天津市卫生防病中心联合主办。于1984年创刊，是环境卫生学专业的学术性期刊（中华预防医学会环境卫生分会唯一认定期刊）。杂志编辑委员会由国内著名的环境卫生学及相关学科的专家、教授组成。本刊报道宗旨是：以预防医学与环境科学相结合，紧密围绕党和国家的卫生工作方针，全方位促进全国各地环境卫生工作水平的提高。主要读者对象：环境卫生、环境医学、环境保护专业工作者，各大专院校卫生学和环境科学的师生等。主要栏目：述评、专题报告、论著、调查研究、技术与方法、监督监测、专业信息、工作交流、卫生标准、综述、讲座等
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首页>环境与健康杂志
- 杂志名称：环境与健康杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华预防医学会,天津市疾病预防控制中心
- 国际刊号：1001-5914
- 国内刊号：12-1095/R
- 出版周期：
期刊荣誉：中华预防医学会系列杂志优秀期刊期刊收录：
人偏肺病毒多表位抗原的构建与表达
李晓燕；孔梅；郭丽茹；杨东靖；苏旭；刘英华；邹明；吕莉琨
关键词：人偏肺病毒, B细胞表位, T细胞表位, 多表位抗原
摘要：目的 构建含人偏肺病毒(hMPV)B细胞和T细胞表位的多表位抗原,并在原核系统表达,评价其免疫原性和免疫反应性.方法 以人偏肺病毒NL/1/00不同蛋白为模板,采用在线生物信息学软件Bepipred、ABCpred、Bcepred、LEPS及LBTOPE预测B细胞表位,以NetMHCpan及NetMHC预测CTL细胞表位,以NetMHCⅡ预测Th细胞表位.综合各软件预测结果,确定候选B细胞及T细胞表位,各表位间加入间隔序列“GPGPG”和“KK”,串联为多表位抗原基因mea,与pET32a(+)连接后转化E.coli BL21(DE3)宿主菌,经含氨苄的LB平板培养基筛选、鉴定获得重组pET32a(+)-mea,经IPTG诱导表达获得多表位抗原(MEA),以镍层析柱纯化,以Western blot鉴定表达蛋白,以MEA免疫小鼠,以ELISA法检测产生抗体效价,以间接免疫荧光法(IFA)检测抗体特异件.结果 共预测筛选人偏肺病毒B细胞表位6个,CTL表位4个,Th细胞表位2个,串联为多表位抗原基因mea,经与pET32a(+)重组后,转化E.coli BL21(DE3)宿主菌,经IPTG 30℃诱导5h,上清及沉淀均有目的蛋白表达.上清经镍层析柱纯化后获得重组多表位抗原MEA,浓度为1 mg/ml.Western blot检测显示,表达的MEA可与抗His抗体结合.经MEA免疫的BALB/c小鼠的抗血清经ELISA检测,抗体效价达105以上;经间接免疫荧光检测,抗血清能与感染vero-E6细胞的hMPV结合.结论 成功构建了hMPV多表位抗原基因,并在原核系统成功表达,获得多表位抗原MEA.该抗原具有很好的免疫原性和免疫反应性,并可与hMPV病毒发生结合,具有病毒特异性.
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