期刊简介
本刊由卫生部主管，中华预防医学会和天津市卫生防病中心联合主办。于1984年创刊，是环境卫生学专业的学术性期刊（中华预防医学会环境卫生分会唯一认定期刊）。杂志编辑委员会由国内著名的环境卫生学及相关学科的专家、教授组成。本刊报道宗旨是：以预防医学与环境科学相结合，紧密围绕党和国家的卫生工作方针，全方位促进全国各地环境卫生工作水平的提高。主要读者对象：环境卫生、环境医学、环境保护专业工作者，各大专院校卫生学和环境科学的师生等。主要栏目：述评、专题报告、论著、调查研究、技术与方法、监督监测、专业信息、工作交流、卫生标准、综述、讲座等
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首页>环境与健康杂志
- 杂志名称：环境与健康杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华预防医学会,天津市疾病预防控制中心
- 国际刊号：1001-5914
- 国内刊号：12-1095/R
- 出版周期：
期刊荣誉：中华预防医学会系列杂志优秀期刊期刊收录：
基于慢病毒介导RNA干扰技术的人PARP-1基因沉默细胞株构建
杨慧；梁海荣；陈佳佳；徐永春；翟璐；唐焕文
关键词：聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1, RNA干扰, 慢病毒, TK6细胞
摘要：目的 利用慢病毒介导的RNA干扰技术构建人淋巴母细胞TK6细胞的PARP-1基因沉默细胞株,为后续PARP-1基因功能和表观遗传学调控机制的研究提供有效的工具细胞.方法 利用瞬时转染方法筛选佳干扰效果的shRNA片段,与慢病毒载体pLVX-shRNA1连接,形成重组质粒,DNA测序鉴定后进行病毒包装,转导TK6细胞,利用嘌呤霉素筛选得到稳定表达PARP-1 siRNA的PARP-1沉默细胞株,并用定量PCR和Western blotting鉴定所构建的细胞株.结果 转染shRNA1、shRNA2、shRNA3、shRNA4细胞的PARP-1相对表达量分别为0.289、0.538、0.375和0.474,故选择shRNA1作为干扰PARP-1基因佳片段.用0.5μg/ml的嘌呤霉素成功筛选出PARP-1沉默细胞株和空载体对照细胞株,并从mRNA、蛋白质、细胞表型来检测PARP-1基因的干扰效率,抑制效率超过80％.结论 成功构建PARP-1的siRNA慢病毒干扰载体,并筛选出PARP-1基因沉默的TK6细胞株,携带shRNA的慢病毒稳定、高效干扰PA RP-1基因表达.
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