期刊简介
本刊由卫生部主管，中华预防医学会和天津市卫生防病中心联合主办。于1984年创刊，是环境卫生学专业的学术性期刊（中华预防医学会环境卫生分会唯一认定期刊）。杂志编辑委员会由国内著名的环境卫生学及相关学科的专家、教授组成。本刊报道宗旨是：以预防医学与环境科学相结合，紧密围绕党和国家的卫生工作方针，全方位促进全国各地环境卫生工作水平的提高。主要读者对象：环境卫生、环境医学、环境保护专业工作者，各大专院校卫生学和环境科学的师生等。主要栏目：述评、专题报告、论著、调查研究、技术与方法、监督监测、专业信息、工作交流、卫生标准、综述、讲座等
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首页>环境与健康杂志
- 杂志名称：环境与健康杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：中华预防医学会,天津市疾病预防控制中心
- 国际刊号：1001-5914
- 国内刊号：12-1095/R
- 出版周期：
期刊荣誉：中华预防医学会系列杂志优秀期刊期刊收录：
Rluc报告基因在大肠杆菌中的表达及检测条件优化
刘广文；董杰；闫梅英；苏旭；井良义；郭凤华；阚飙
关键词：海肾荧光素酶, BL21, 表达, 优化
摘要：目的 研究海肾荧光素酶报告基因(Rluc)在大肠杆菌中的表达情况及优化检测条件.方法 将Rluc克隆入大肠杆菌JM109,提取质粒后用EcoR Ⅰ和Sal Ⅰ进行双酶切,并与制备好的pET-30a(+)载体连接,再转化入大肠杆菌BL21.然后用ViviRen底物检测不同稀释液、不同浓度及时间等情况下重组克隆子中Rluc报告基因的荧光表达量,绘制表达曲线.结果 成功构建了Rluc在B121中的表达克隆子;ViviRen底物用PBS稀释比用LB稀释的检测灵敏度高约2倍;荧光检测的表达曲线在底物加入后迅速上升,至10min时达高峰,然后缓慢下降;阳性克隆子中Rluc的荧光表达线性检测范围广,阴性对照菌株中背景低;总结出了ViviRen底物用PBS稀释、荧光信号在10min后进行瞬时测定等优化检测条件.结论 Rluc报告基因可在大肠杆菌内高效表达,检测方法 具有特异性好、灵敏度高等特点.
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